2022-11-07 10:46:07 来源:
-01-NK细胞来源和供体选择
NK细胞发现于20世纪70年代,主要与杀死感染的微生物和恶性转化的同种异体和自体细胞有关。在人体内,NK细胞来源于CD34+共淋巴祖细胞。据估计,NK细胞的半衰期大约为7~10天,它们通过与DC细胞的相互作用发挥关键的免疫调节功能。
▉ 外周血或脐带血来源
原代NK细胞可以从外周血(PB-NK细胞)中收获或来自脐带血(CB-NK细胞)。PB-NK细胞,是2005年由Dario Campana领导的首次成功将CAR构建体递送到NK细胞中的平台。PB-NK细胞为目前正在临床试验的各种产品提供了基础材料。
▉ 诱导多能干细胞来源
iPSC是NK细胞的一个的来源,iPSCs可高效扩增,还能体外分化。通过iPSC可以制造大量遗传背景一致的NK细胞产品。iPSC的制备需要种子细胞少,可大量培养,成本较低,可实现自体供给,免疫原性较低。
iPSC来源的NK细胞有两个缺点,第一,表达低水平的CD16。第二,iPSC可能含有“表观遗传记忆”,而这可能会影响与供体细胞不同的特定细胞谱系的发育。
▉ NK细胞系来源
NK-92是第一个获得美国FDA批准进行临床试验的NK细胞,是一种均匀的、永生的NK淋巴瘤细胞系,可以离体扩增。NK-92细胞缺乏大多数KIRs的表达,因此不太可能被抑制。
然而,在患者给药之前需要照射NK-92衍生的细胞产物,这影响体内的长期持久性和整体性治疗潜力。另一个缺点是,由于缺乏CD16表达,NK-92细胞缺乏通过ADCC介导细胞杀伤的能力。
-02-如何增强NK细胞功能
▉ 嵌合抗原受体
▉ NK细胞衔接器
NK细胞衔接器,可以将NK细引导到肿瘤部位,通过触发NK细胞上的激活受体来引发强烈的抗肿瘤反应,同时结合肿瘤细胞上的目标抗原。开发策略包括三个特异性或四个特异性设计,靶向肿瘤上的多种抗原,或通过交联细胞因子部分,促进NK扩增和存活,旨在增强抗肿瘤作用。细胞衔接器的使用,因此代表了一种更简单,成本更低的制造工艺,来提供能够诱导CAR样活性的产品。
▉ 细胞因子
细胞因子,可以增强NK细胞毒性,并促进NK细胞增殖。连续的离体刺激,会使NK细胞“细胞因子上瘾”,并在没有体内细胞因子支持的情况下输注这些细胞时会降低持久性。通过基因工程,NK细胞被修饰以产生细胞因子,维持细胞效力,增殖和持久性。这种自分泌维持引起了人们的极大兴趣,CAR-NK细胞正在出现。
▉ 克服免疫抑制
为了克服免疫抑制,目前的策略集中在两个方面:
改变肿瘤的代谢构成或修改免疫细胞中的基因表达程序,以保护它们免受TME中抑制性代谢物的侵害;
通过小分子抑制剂或拮抗抗体阻断肿瘤细胞上的CD73克服腺苷介导的免疫抑制。
在临床前研究中,通过基因编辑删除CAR-T细胞和CAR-NK细胞中的腺苷A2A受体,显示出抗肿瘤的功效。
▉ 阻断免疫检查点
肿瘤可逃避免疫监视(比如免疫检查点的参与),使用相应单抗可逆转NK功能障碍。然而,通过单抗来调节患者的免疫细胞,但需要多次输注。随着基因编辑技术的进步,NK细胞可以被稳定修饰,从而增强NK细胞功能。此外,在确定CISH(细胞因子诱导的含SH2蛋白)作为NK细胞功能的关键负调节蛋白后,设计了缺乏这种细胞内细胞因子检查点的CAR-NK细胞,其代谢适应性和抗肿瘤活性明显提升。
▉ 加强NK细胞向肿瘤的运输
-03-临床经验教训
临床研究表明,NK细胞在治疗血液系统恶性肿瘤方面具有安全性和有效性。重要的是,无论采用哪种方法,NK细胞疗法都一直显示出良好的安全性。迄今为止,没有观察到CRS或GVHD。然而,大多数报道的成功仅限于血液系统恶性肿瘤,并非所有患者都对NK细胞治疗有反应,有些患者最终会复发。
无论如何,CAR-NK 细胞疗法是一个很有前途的临床研究领域,对某些癌症患者具有良好的安全性和初步疗效。相信,CAR-NK细胞疗法可能会导致肿瘤免疫治疗的革命性进展。